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: #PCR #cDNA 합성 #qPCR #Cloning #Recombinant Protein #ELISA #Cell culture #Antibody #Assay #전기영동 #NGS #Gene transfer #DNA/RNA 정제 #단백질 검출, 발현, 정제 #기기, 소모품 #기타

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그린비 블로그

[VectorBuilder] GMP 등급의 IVT mRNA 와 LNP 제조

24-05-27 09:04

알고 계시나요?

VectorBuilder가

IVT mRNA 제조 및 LNP (lipid nanoparticle) 치료제 개발을 위한

광범위한 CRO 및 CDMO 서비스를 제공한다는 사실!

그것도 GMP 시설의 제품과 서비스로 제공한다는 건 안 비밀이죠.

VectorBuilder는 GMP 등급의 유전자 치료 벡터 제조에 대한

광범위한 전문 지식과 노하우를 가지고 있으며 수많은 고객과 협력하여

초기 개발 단계를 위한 연구 등급 벡터,

전임상 단계를 위한 GMP-like 벡터,

임상 단계를 위한 GMP 등급 벡터를

제공하고 있어요.

이미지 출처: VectorBuilder

최고의 CRO, CDMO 서비스

VectorBuilder의 GMP 등급의 유전자 치료 벡터 제조에 대한 광범위한 전문 지식과 노하우를 이용하여 다음의 서비스를 제공해요.

IVT(in vitro transcription) mRNA 제조, LNP (lipid nanoparticle) 치료제 개발을 위한 CRO 및 CDMO 서비스 제공
혁신적인 벡터 디자인 플랫폼과 풍부한 경험을 바탕으로 최적의 IVT 벡터 디자인, 대용량 IVT mRNA 제조, LNP encapsulation 가능
고객의 다양한 연구 및 임상 요구에 맞는 철저한 품질 관리 제공
고객의 신약 연구 및 전임상 연구를 포함하여 다양한 다운스트림 요구사항을 충족하는 여러 등급의 서비스 제공

IVT mRNA의 생산 워크플로우

Vectorbuilder의 IVT mRNA의 생산 워크플로우

제공되는 IVT mRNA 등급

Research-grade mRNA

Research-grade mRNA는 말 그대로 기초 연구와 신약 탐색 연구에 적합해요.

모든 다운스트림 연구 요구사항에 적합한 고품질을 보장하기 위해서 엄격한 QC로 표준화된 실험 조건에서 제작됩니다.

research-grade mRNA 자세히 살펴보기

이미지 출처: VectorBuilder

GMP-like mRNA

GMP-like mRNA는 약물 안전성 및 대사에 대한 동물 실험과 같은 전임상 연구를 위한 등급이에요.

GMP 가이드라인의 주요 특징을 채택하는 방식으로 생산되고,

생산은 문서 통제 및 추적성을 갖춘 분리된 생산시설에서 수행됩니다.

따라서 GMP-like 등급은 최종 GMP 제품의 소규모 모방으로 볼 수 있지만, 비용은 훨씬 저렴하고 일정은 더 빠른 장점이 있어요.

GMP-like mRNA는 RNase가 없는 제조 및 정제 조건에서 생산될 수 있고,

제품 출하 시 COA가 제공되며 요청 시 TSE/BSE statement가 제공됩니다.

GMP-grade mRNA Coming soon

GMP-grade mRNA는 GMP 가이드라인을 엄격하게 준수하여 인증된 GMP 제품군에서 생산되며,

생산 공정 전반에 걸쳐 포괄적인 품질 보증 시스템이 구현됩니다.

생산된 mRNA가 원하는 품질 및 안전성 표준을 충족하는지 확인하기 위한 광범위한 in-process와 release QC assay를 수행합니다.

제품 출하 시 생산 프로세스와 COA가 제공되며, 요청 시 기타 문서도 제공 가능합니다.

[ 다양한 등급의 IVT mRNA 비교 ]

	Research-grade	GMP-like
Applications	Basic research, drug discovery, and preclinical studies	Preclinical studies such as animal testing of drug safety and metabolism
Production scales	mRNA: 0.1-10 mg LNP: 0.1-3 mg	mRNA: 0.01-5 g LNP: 3-20 mg
Turnaround time	49-71 days ‧ Vector design & cloning: 26-36 days ‧ Plasmid production & linearization: 14-21 days ‧ IVT mRNA production: 14-21 days ‧ LNP encapsulation: 9-14 days	59-90 days ‧ Vector design & cloning: 31-41 days ‧ Plasmid production & linearization: 14-28 days ‧ IVT mRNA production: 14-28 days ‧ LNP encapsulation: 14-21 days
Quality system	ISO9001	ISO9001 while adopting key features of GMP system
Production facility	In parallel production in shared laboratory space	Productions done in segregated suites
Document control and traceability	No	Yes
QC and release	Standard QC	Performed on a case-by-case basis depending on individual project needs (see below)
Aseptic fill/finish	N/A	Available upon request
Storage of retention sample	Available upon request	Available upon request
Other deliverable	COA	1. COA 2. Manufacturing summary 3. TSE/BSE statement upon request

LNP (Lipid Nanoparticle) Encapsulation

VectorBuilder는 Lipid Nanoparticle 혼합을 위한 필요 장비 전체를 보유하고 있으며, 철저한 품질관리를 거쳐서 제조하고 있어요.

이 생산 시설은 고객 맞춤형 Lipid formulation을 제공할 수 있고,

최첨단 장비를 사용하여 microfluidic mixing, dilution, buffer exchange, sterile filtration 및 fill/finish를 수행할 수 있습니다.

LNP-mRNA의 대표적인 QC 결과

A. 입자의 움직임으로 인해 변동하는 빛의 강도 차이를 측정하는 dynamic light scattering (DLS)을 통해 입자 사이즈를 결정했습니다. Polydispersity index (PDI)는 입자 사이즈에 대한 샘플의 heterogeneity를 반영합니다.

B. Zeta potential는 LNP의 안정성을 반영합니다. 샘플의 Zeta potential은 -1.872 mV에서 +1.872 mV 사이입니다.

Quality Control Assays

제 품	분 석 항 목	분 석 방 법
IVT DNA template	Concentration	Spectrometry
	Identity	Gel electrophoresis, Sanger sequencing
	Linearization	Capillary gel electrophoresis
	Residual host E. coli DNA	qPCR
mRNA	Concentration	UV-Vis spectrometry
	Identity	Capillary gel electrophoresis, reverse transcription followed by Sanger sequencing
	Capping efficiency	LC-MS, Capillary gel electrophoresis
	PolyA tail integrity	LC-MS, Capillary gel electrophoresis
	Residual protein	NanoOrange assay
	Residual plasmid	qPCR
	dsRNA	Dot blot
	Endotoxin	Kinetic chromogenic assay (KCA)
LNP	Endotoxin	Kinetic chromogenic assay (KCA)
	Encapsulation efficiency	RiboGreen assay
	Diameter, PDI, and Zeta potential	Zetasizer