우선, 간단하게 알아볼까요?

Flow cytometry란 무엇인가요?

Flow cytometry는 세포 또는 입자(세포 내 단백질, peptide, DNA)들의 물리적, 화학적 특성을 분석하는 데 사용되는 기법이에요.

레이저 빔 기술을 사용하여 세포의 이질적인 집단 내에서 개별 세포의 크기, 모양 및 특성을 평가하고, 특정 분석 소프트웨어 프로그램을 사용하여 심층적으로 분석할 수 있는 정량적 방법이죠.

Flow cytometry는 주로 아래 5가지 용도로 사용됩니다.

• •형광에 의한 Immunophenotyping/cell sorting
• 이것은 flow cytometry의 가장 일반적인 application이라고 할 수 있어요.
• 면역 표현형(immunophenotyping)은 면역 세포가 발현하는 특정 항원에 의해 검출되고 분류되는 방법이에요.
• 예) T helper cell과 cytotoxic T cell 은 각각 CD4 및 CD8의 발현으로 구분

• •크기와 복잡도에 따른 cell sorting
• 시료 내 세포의 크기(전방 산란)와 세포의 과립도(측방 산란)를 분석할 수 있어요.
• 여기서 세포의 과립도는 세포 소기관의 수와 같은 세포 내부의 복잡성을 기반으로 합니다.
• 특정 세포 유형에 대한 전방 산란과 측방 산란 기준 값과 비교를 하면 시료 내 세포의 유형을 식별할 수 있게 되지요.

• •세포 주기 분석
• 세포 주기의 4가지 단계를 측정할 수 있는 형광을 사용하여 분석하는 세포가 어떤 단계에 있는지 측정할 수 있어요.

• •세포 수/생존율 분석
• Dye exclusion 방법은 염색 여부로 살아있는 세포와 죽은 세포를 구별할 수 있죠.
• 이 방법은 죽거나 죽어가는 세포는 염료를 흡수할 수 있지만 살아 있는 세포는 흡수할 수 없는 것을 원리로 해요.
• 이와 같이 flow cytometry를 이용해서 형광 흡수로 세포의 사멸과 괴사를 구별할 수 있어요.
• 또한 세포 내의 형태학적, 생화학적, 분자적 변화를 분석하여 세포 사멸과 괴사를 구별할 수 있어요.

• •세포 증식 분석
• 세포 증식 flow cytometry로 많이 활용하는 분석 중 하나에요.
• 세포 증식을 분석하기 위해 샘플의 세포막에 carboxyfluorescein succinimidyl ester(CFSE)라는 형광 표지를 해요.
• 세포 분열(mitosis)이 일어나면 염료의 절반이 각각의 딸 세포로 전달되기 때문에, 결과적으로 형광의 감소와 증식 속도는 비례하지요.

Flow cytometry에서 antibody 역할은.

세포 표면의 특정 항원 또는 세포 내의 특정 항원에 결합을 해요.

이들은 형광 프로브와 직접 conjugation 되거나 형광 프로브가 conjugation된 2차 항체와 결합하지요.

이것은 flow cytometry가 특정 표적의 특징, 예를 들어 특정 세포 표면 수용체의 발현을 기반으로 세포를 정렬할 수 있게 해요.

이러한 방식으로 flow cytometry는 세포수, 분류, 단백질 발현의 변화를 감지하거나 세포의 세포 주기 상태를 평가하는 데 사용될 수 있어요.

C57BL/6 murine splenocytes를 Anti-Mouse CD3 Monoclonal Antibody(Alexa Fluor 647 conjugated) 로 염색 (회색 히스토그램)

염색되지 않은 림프구(검정색 히스토그램)가 대조군으로 사용

AssayGenie의 Flow Cytometry Validated Antibody 제품의 특징!

• 다양한 형광 선택:
• 잘 특성화된 클론에 13가지 형광을 제공해요! 때문에 다른 형광의 간섭 없이 필요한 조합으로 panel을 구성할 수 있어요.

• 광범위한 제품:
• 3,500개 이상의 세포 내 및 세포 외 단백질 타깃이 준비되어 있습니다. 다양한 문헌에서 검증된 클론뿐만 아니라, 타사에는 없는 고유한 클론도 보유하고 있으니 꼭 검색해 보세요!

• 검증된 라벨링과 친화도:
• 각 항체는 엄격한 테스트를 거쳐 최적의 라벨링과 강력한 친화도를 보장합니다. 진보된 conjugation 기술 적용으로 높은 민감도와 낮은 background 제품을 제공해요.

• 프리미엄 mAbs:
• Assay Genie의 FC 검증 항체는 최고 품질로 실험의 정확성과 일관성을 보장합니다. 매우 특이적이고 복잡한 panel 구성에 이상적이에요.

• 최첨단 라벨링 기술:
• 첨단 기술을 적용하여 면역 세포의 효율적인 식별과 세포 활성화 상태의 정확한 평가를 용이하게 합니다.

• 연구에 맞춤 제품:
• 특정 Flow Cytometry 연구 요구 사항에 완벽하게 부합하는 제품을 찾으실 수 있어요. 타사에는 없는 고유의 conjugate도 제공하고 있으니, 검색해 보세요.

• 다양한 제품 사이즈 :
• 20, 100, 200 Test Packs
• 25ug, 50ug, 100ug, 200ug, 1mg Packs

Flow Cytometry Validated Antibody 제품만의 고급 Conjugation 기술

1) Flow Cytometry Fluorophores

Fluorophore	Brightness	Emission Color	Laser	Excitation Max (nm)	Emission Max (nm)
GenieFluor Violet 450	✓✓	Blue	405	410	450
PE	✓✓✓✓✓	Yellow	488, 561	495, 565	575
FITC	✓	Green	488	490	530
GenieFluor 488	✓✓✓	Green	488	595	520
PerCP	✓	Red	488	440, 480, 675	675
PE/Cyanine5	✓✓✓✓✓	Red	488, 561	495, 565, 655	670
PE/Cyanine5.5	✓✓✓✓	Red	488, 561	495, 565, 675	690
PE/GenieFluor 594	✓✓✓✓✓	Red	488, 561	566	610
APC	✓✓✓✓	Red	633	650	660
GenieFluor 647	✓✓✓✓	Red	633	650	670
PerCP/Cyanine5.5	✓✓✓	Far Red	488	440, 480, 675	675
GenieFluor Red 780	✓✓	Infrared	633	625	765
PE/Cyanine7	✓✓✓✓✓	Infrared	488, 561	495, 565, 755	775

2) Highly Specific Data

3) Low Background

이러한 특징의 Flow cytometry 항체를 이용하여 복잡한 패널도 간편하게 구성할 수 있습니다.

아래 링크에서 AssayGenie의 Flow cytometry antibody 제품들을 확인하실 수 있어요!

새로운 패널 제작, 타깃에 대한 문의가 있으실 땐 언제든지 그린비바이오를 찾아주세요!